प्रोटीन समारोह का अध्ययन करने के लिए आणविक जीव विज्ञान की सबसे बुनियादी तकनीकों में से एक है आणविक क्लोनिंग। इस तकनीक में, ब्याज की प्रोटीन के लिए डीएनए कोडिंग पीसीआर और / या प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग प्लाज्मिड (एक्सप्रेशन वेक्टर) में क्लोन किया जाता है। एक वेक्टर में 3 विशिष्ट विशेषताएं हैं: प्रतिकृति का एक मूल, एक एकाधिक क्लोनिंग साइट (एमसीएस) और एक चयनात्मक मार्कर आमतौर पर एंटीबायोटिक प्रतिरोध। नकल की उत्पत्ति प्रतिकृति / प्रतिलेखन शुरू साइट से प्रमोटर क्षेत्र अपस्ट्रीम होगा। यह प्लाज्मिड या तो जीवाणु या पशु कोशिकाओं में डाला जा सकता है। बैक्टीरियल कोशिकाओं में डीएनए पेश करने से नग्न डीएनए, सेल सेल संपर्क के जरिये संयुग्मन या वायरल सदिश के माध्यम से पारगमन द्वारा परिवर्तन के माध्यम से परिवर्तन किया जा सकता है। भौतिक या रासायनिक माध्यमों से यूकेरियोटिक कोशिकाओं में डीएनए का परिचय, जैसे पशु कोशिकाओं को अभिकर्मक कहा जाता है। कई अलग-अलग अभिकर्मक तकनीक उपलब्ध हैं, जैसे कि कैल्शियम फॉस्फेट अभिकर्मक, इलेक्ट्रोपोरेशन, मायक्रोइन्जेक्शन और लिपोसोम अभिकर्मक। प्लाज्मिड को जीनोम में एकीकृत किया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप एक स्थिर अभिकर्मक हो सकता है, या जीनोम से स्वतंत्र रह सकता है, जिसे क्षणिक अभिकर्मक कहा जाता है। [6] [7]
ब्याज की प्रोटीन के लिए डीएनए कोडिंग अब एक सेल के अंदर है, और प्रोटीन अब व्यक्त किया जा सकता है। विभिन्न स्तरों पर ब्याज की प्रोटीन व्यक्त करने में मदद करने के लिए विभिन्न प्रकार के सिस्टम, जैसे कि inducible promoters और विशिष्ट सेल-सिग्नलिंग कारक, उपलब्ध हैं। प्रोटीन की बड़ी मात्रा में तब जीवाणु या यूकेरियोटिक कोशिका से निकाला जा सकता है। विभिन्न स्थितियों के तहत एंजाइमेटिक गतिविधि के लिए प्रोटीन का परीक्षण किया जा सकता है, प्रोटीन को क्रिस्टलीकृत किया जा सकता है ताकि इसकी तृतीयक संरचना का अध्ययन किया जा सके, या दवा उद्योग में, प्रोटीन के खिलाफ नई दवाओं की गतिविधि का अध्ययन किया जा सकता है
